Inmovilización de biomacromoléculas sobre materiales sólidos para su aplicación como biosensores

Abstract

Dentro del presente TFG se ha trabajado en diferentes aspectos para avanzar en este campo, se ha estudiado y caracterizado un soporte versátil, barato y fácil de activar como es la celulosa, en forma de papel comercial. Se ha podido observar como estos son soportes porosos y fibrosos con gran facilidad para ser activados, por lo que son excelentes candidatos para la inmovilización de biomacromoléculas, especialmente anticuerpos. Se ha estudiado tanto la inmovilización, como la actividad de diferentes biomacromoléculas. En primer lugar, la inmovilización de una proteína pura y fácil de cuantificar como la proteína seroalbúmina bovina (BSA) dado que es la proteína que se usa como estándar en el método de medida de proteína. De este modo se pudo estudiar la capacidad de carga de proteína en los soportes siendo capaces de inmovilizar 0,177 mg de proteína /cm2. Posteriormente, se inmovilizaron diferentes enzimas para valorar la recuperación de actividad catalítica tras el proceso de inmovilización. Esta en general no fue satisfactoria para enzimas globulares, con recuperaciones nulas en todos los casos. Seguidamente, se ha procedido al estudio de la inmovilización de anticuerpos anti-salmonela y antiperoxidasa. La inmovilización sobre estos soportes demostró ser satisfactoria dado que en ambos casos se consiguió un buen porcentaje de inmovilización 89,5% y un 88% respectivamente, similar al obtenido utilizando como soportes de referencia la agarosa y resina acrílica. Además de esto, la actividad biológica de los anticuerpos antiperoxidasa fue similar a la obtenida con estos soportes de referencia. Se han hecho pruebas preliminares de su posible utilización en sistemas de resonancia por radiofrecuencias obteniéndose excelentes resultados de detección de muestras con BSA inmovilizada incluso a concentraciones muy bajas 0,00457 mg/cm2.